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      寵物檢測熒光PCR技術的優(yōu)勢有哪些?

      更新時間:2023-05-26      點擊次數:1820
        寵物檢測熒光PCR是一種基于DNA復制和擴增的技術,其適用于檢測特定序列的DNA,并從中獲得更多或全部的DNA。PCR可以在短時間內產生大量純的、具有特定序列的DNA分子,是現(xiàn)代分子生物學的基礎技術之一。而熒光PCR則是一種在傳統(tǒng)聚合酶鏈反應的基礎上加入熒光探針以實現(xiàn)更準確的檢測方法。
       
        原理是這樣的:先需要收集需要檢測的寵物樣本,如口腔拭子、血液或組織等樣本。然后需要使用熱解法將其中的DNA裂解,使其變?yōu)閱捂?。接著添加兩個特異性引物單元,即“前向引物”和“反向引物”,并加入熒光探針,該探針含有一個熒光染料和一個淬滅染料,可以與細胞外核酸(GC)結合。當引物與模板相互作用時,在3'端區(qū)域上進行擴增,此時探頭發(fā)生水解,導致熒光染料從淬滅染料釋放,并且發(fā)生熒光信號釋放,以此來檢測PCR反應產物??梢酝ㄟ^實驗室設備觀察PCR反應體系中熒光信號變化的趨勢,即可對樣品DNA進行定量或定性分析。
       
        利用特定引物擴增所有目標區(qū)域內存在的DNA,引物的設計根據目標序列的基本信息選擇合適的引物序列,使其在PCR過程中,能夠按照特定規(guī)則穩(wěn)定地結合到待擴增模板的特定位置上。與普通PCR不同,熒光PCR選用帶有熒光生物素標簽的引物,可以將擴增的目標串聯(lián)片段和引物結合成一個分子。通過Real-timePCR系統(tǒng)可以同時進行擴增反應和融合曲線分析。這樣,在后期的熒光檢測過程中,就可以對所擴增目標片段的數量進行準確的定量。
       
        寵物檢測熒光PCR技術的其他優(yōu)勢還包括:
       
        高度靈敏性:可以從非常小的樣本量開始擴增,探測樣本中確定污染,擴增低拷貝的模版。
       
        高速度:相比傳統(tǒng)PCR技術,不需要進行后續(xù)電泳與染色分析,可以在更短的時間內完成檢測。
       
        高熱穩(wěn)定性引物和熒光探針被特意設計,確保了其在高溫下不會失活或降解。
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